GB 29705-2013 食品安全国家标准
水产品中氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯多残留的测定
气相色谱法
1范围
本标准规定了水产品中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯残留量的制样和气相色谱测定方法。
本标准适用于鱼和虾可食性组织中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯残留量的检测。
2规范性引用文件
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GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
试料中残留的氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯，用氯化钠脱水，乙腈提取，正己烷除脂，C18柱净化，气相色谱测定，外标法定量。
4试剂和材料
以下所用的试剂，除特别注明外均为分析纯试剂；水为符合GB/T6682规定的一级水。
4.1氯氰菊酯 、氰戊菊酯、溴氰菊酯标准品：含量≥99.0%。
4.2乙腈：色谱纯。
4.3甲醇：色谱纯。
4.4正己烷：色谱纯。
4.5苯：色谱纯。
4.6乙酸乙酯：色谱纯。
4.7三氯jia烷：色谱纯。
4.8氯化钠：优级纯，650℃灼烧4 h，冷却，干燥保存，备用。
4.9甲醇水溶液：取甲醇100mL，用水溶解并稀释至300mL。
4.10乙腈正己烷烷溶液：取乙腈10mL，用正己烷溶解并稀释至110mL。
4.11 C18固相萃取柱，200mg/3mL，或相当者。
4.12氧化铝固相萃取柱：200mmg/3ml，或相当者。
4.13 100μg/mL氯氰菊酯 、氰戊菊酯、溴氰菊酯混合标准贮备液，精密称取氯氰菊酯 、氰戊菊酯、溴氰菊酯标准品各10mg，于1mL 棕色量瓶中，用苯溶解并稀释至刻度，配制成浓度为100μg/mL的混合标准贮备液。2℃~8℃保存，有效期3个月。
4.14 5μg/mL氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯混合标准工作液：精密称取100μg/mL氯氰菊酯和溴氰菊酯混合标准贮备液500μL，于10mL棕色量瓶中，用苯稀释至刻度，配制成浓度为5μg/mL的氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯混合标准工作液。2℃~8℃保存，有效期3个月。
5仪器和设备
5.1气相色谱仪：配63Ni电子捕获检测器。
5.2分析天平：感量 0.00001 g。
5.3天平：感量 0.01 g。
5.4 均质机。
5.5旋转蒸发仪。
5.6离心机。
5.7.调速混匀器。
5.8氮吹仪。
5.9 固相萃取装置。
5.10鸡心瓶：125 mL。
5.11具塞离心管：10 mL、50 mL。
6试料的制备与保存
6.1 试料的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试鱼和虾可食性组织，绞碎，并使均质。
——取均质后的供试样品，作为供试试料。
——取均质后的空白样品，作为空白试料。
——取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。
6.2试料的保存
-20℃以下保存。
7测定步骤
7.1提取
称取试料5 g±0.05 g，于50 mL具塞玻璃离心管中，加乙腈15 mL，振荡5 min，加氯化钠1.5 g振荡2 min，4 000 r/min离心5 min，取上清液于另一具塞玻璃离心管中，残渣中加乙腈15 mL，重复提取一次，合并两次上清液，加乙腈正己烷溶液10 mL，振荡混合2 min，4 000 r/min离心5 min， 除去上层正己烷液，乙腈液中加正己烷10 mL，重复提取一次，弃上层正己烷液。取乙腈层液至鸡心瓶中，于45℃水浴旋转蒸发至干，用甲醇2 mL溶解残余物，加水4 mL，混匀，备用。
7.2净化和浓缩
C18柱依次用甲醇5 mL、三氯jia烷5 mL、甲醇5 mL和甲醇水溶液5 mL活化，取备用液过柱，控制流速1滴/s。用甲醇水溶液5 mL淋洗，流干，加苯4 mL洗脱，收集洗脱液，备用。
氧化铝柱用乙腈5mL活化，取备用洗脱液过柱。加苯1mL洗脱，重复3次。合并三次洗脱液于10 mL刻度离心管中，用苯定容至5 mL，供气相色谱测定。
7.3标准曲线的制备
精密量取5μg/mL氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯混合标准贮备液适量，用苯稀释，配制成依度分别为0.5、1、5、25、50、100和500 ng/mL的系列混合标准溶液，供气相色谱测定。以测得峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。求回归方程和相关系数。
7.4 测定
7.4.1色谱条件
7.4.1.1检测器：63Ni电子捕获检测器。
7.4.1.2色谱柱：5%苯基和 95%聚二甲基硅氧烷。
7.4.1.3检测器温度：310℃。
7.4.1.4进样口温度：230℃。
7.4.1.5进样方式 ：不分流进样。
7.4.1.6载气：99.999%高纯氮气。
7.4.1.7柱流速：2.5 mL/ min，尾吹为：25 mL/min。
7.4.1.8柱温程序：初始柱温160℃，维持1 min，30℃/min升至250℃，维持2 min，5℃/min升至280℃，维持10 min。
7.4.1.9进样量：1μL。
7.4.2测定法
取试样溶液和相应的标准溶液，作单点或多点校准，按外标法，以峰面积计算。标准溶液及试样溶液中氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯响应值应在仪器检测的线性范围之内。在上述色谱条件下，标准溶液和空白添加试样溶液的高效液相色谱图见附录A。
7.5空白试验
除不加试料外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。
8结果计算和表述
试料中氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯的残留量(μg/kg)按式(1)计算：
式中：
X——供试试料中相应的氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯的残留量，单位为微克每千克(μg/kg)；
A——试样中相应的氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯的峰面积；
Cs——标准溶液相应的氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；
V——最终试样体积，单位为毫升(mL)；
As——标准工作溶液中相应的氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯的峰面积；
m——供试试料质量，单位为克(g)。
注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。
9检测方法灵敏度、准确度和精密度
9.1 灵敏度
本方法的检测限为0.2μg/kg，定量限为1μg/kg。
9.2 准确度
本方法在1μg/kg~10μg/kg添加浓度水平上的回收率70%~100%。
9.3 精密度
本方法的批内相对标准偏差≤15%，批间相对标准偏差≤20%。
